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叶绿素测定仪的实验步骤介绍

发布时间:2016-07-08 点击次数:4076 文章来源:http://www.tpyn.net/

    叶片是植物的重要器官之一,其之所以呈现为绿色,是因为叶片含有丰富的叶绿素含量,叶绿素是植物进行光合作用的主要色素,通过使用叶绿素测定仪对叶绿素含量进行测定,我们可以判断植物的长势以及其需氮肥情况。那么它是如何进行测定的呢?下面内容介绍叶绿素测定仪的实验步骤。

    1、取新鲜植物叶片(或其它绿色组织)或干材料,擦净组织表面污物,剪碎(去掉中脉),混匀。

    2、称取剪碎的新鲜样品0.2g,共3份,分别放入研钵中,加少量石英砂和碳酸钙粉及2~3ml95%乙醇,研成均浆,再加乙醇10ml,继续研磨至组织变白。静置3~5min。

    3、在使用叶绿素测定仪进行测量过程中,取滤纸1张,置漏斗中,用乙醇湿润,沿玻棒把提取液倒入漏斗中,过滤到25ml棕色容量瓶中,用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次,最后连同残渣一起倒入漏斗中。

    4、用滴管吸取乙醇,将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至25ml,摇匀。

    5、把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内。以95%乙醇为空白,在波长665nm、649nm下测定吸光度。

    6、然后将叶绿素测定仪测定得到的吸光值代入公式,就可以得到叶绿素a和叶绿素b的浓度,二者之和为总叶绿素的浓度。最后根据以下公式计算出植物组织中叶绿素的含量。叶绿素的含量(mg/g)= [叶绿素的浓度×提取液体积×稀释倍数]/样品鲜重(或干重)。


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